熟悉細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的小伙伴，對(duì)動(dòng)物血清應(yīng)該不陌生吧？

血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因子后，分離出的淡黃色透明液體（理論上）或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、激素和各種生長(zhǎng)因子、結(jié)合蛋白、促接觸和生長(zhǎng)因子，使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。

其實(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)從上個(gè)世紀(jì)開(kāi)始發(fā)展至今，經(jīng)歷了多個(gè)階段：

1885年Roux生理鹽水培育雞胚組織；

1903-1906年Jolly和Beebe等發(fā)明了懸滴培養(yǎng)；

1907年Harrison培養(yǎng)蛙胚神經(jīng)成功；

1910、1912年Carrel

完善了懸滴培養(yǎng)法；

1923年Carral設(shè)計(jì)創(chuàng)立了卡氏瓶培養(yǎng)法；

隨后培養(yǎng)器具不斷推陳出新，

塑料瓶、皿、多孔培養(yǎng)板的使用逐漸普遍。

在培養(yǎng)基方面

也經(jīng)歷了巨大變革，

天然培養(yǎng)基?合成培養(yǎng)基

雞胚浸出液?動(dòng)物血清

直至60年代出現(xiàn)無(wú)血清培養(yǎng)基。

而動(dòng)物血清的種類，

也愈加豐富：

牛血清、馬血清、豬血清，

還有兔、雞等動(dòng)物的血清，

都有它們的用武之地。

動(dòng)物不同，分離出的血清也會(huì)有所不同。物種來(lái)源相同的血清，根據(jù)采血時(shí)間、血源品質(zhì)也會(huì)分出不同的類別。有些時(shí)候，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，還要對(duì)血清進(jìn)行一些特殊的加工，因此，市面上的血清種類就變得五花八門了。

所以今天就來(lái)給大家簡(jiǎn)單介紹一下，常見(jiàn)的細(xì)胞學(xué)動(dòng)物血清有哪些，各自有什么特點(diǎn)，Let's go！

01

牛血清

牛來(lái)源的血清，可以細(xì)分為很多種：

根據(jù)采血時(shí)間分

合格的血清產(chǎn)品，需要嚴(yán)格控制采血時(shí)間點(diǎn)，才能保證最基本的血清質(zhì)量。以胎牛血清為例：

一旦牛胎齡過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致補(bǔ)體系統(tǒng)逐漸發(fā)育*，進(jìn)而使制備的血清中含有補(bǔ)體，影響血清品質(zhì)。另外，胎牛中各類生長(zhǎng)因子也會(huì)隨著生長(zhǎng)發(fā)育而逐漸喪失，進(jìn)一步使血清品質(zhì)下降。

實(shí)驗(yàn)不是千篇一律的，根據(jù)不同的需求，有時(shí)候需要對(duì)血清進(jìn)行一些“定制化處理"。

根據(jù)不同品質(zhì)分

根據(jù)內(nèi)毒素含量不同，血清可以分為不同品質(zhì)：

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí)，此血清為特級(jí)胎牛血清；

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml時(shí)，此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清；

當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí)，此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清；

根據(jù)不同處理分

透析胎牛血清：透析過(guò)濾去除10000D以下小分子（如次huang嘌呤和胸腺核苷），避免外源小分子對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實(shí)驗(yàn)（例如同位素標(biāo)記特定小分子，并加入到培養(yǎng)體系中，以研究細(xì)胞代謝），也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應(yīng)用。

去外泌體血清：通過(guò)超速離心法去除絕大部分外泌體的血清，適用于外泌體相關(guān)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究。

超低lgG的血清：使用親和層析等工藝，去除IgG，使其水平低于要求值，可用于抗體、病毒和病毒反應(yīng)以及細(xì)胞表面抗原表位相關(guān)研究。

活性炭/葡聚糖處理的血清：可降低血清中類固醇激素的濃度，例如雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、T3 和 T4。適用于相關(guān)激素研究的實(shí)驗(yàn)。

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02

馬血清

馬血清一般分為兩種：

第一種馬血清含有的大分子蛋白比較多，適用于蛋白封閉；

第二種馬血清為細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別。它經(jīng)過(guò)多次過(guò)濾，祛除了許多大分子蛋白，但保留了血清中促細(xì)胞生長(zhǎng)的活性因子，因而能用于細(xì)胞培養(yǎng)，例如神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中則需要添加馬血清。

優(yōu)質(zhì)的馬血清來(lái)自健康馬血液，為封閉系統(tǒng)內(nèi)無(wú)菌采血過(guò)濾而成，為淡黃色澄清液體，超低內(nèi)毒素，無(wú)溶血，無(wú)異物，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體、噬菌體等。

03

豬血清

豬血清，常用于豬肺炎支原體疫苗的生產(chǎn)。

在對(duì)細(xì)胞和活疫苗進(jìn)行支原體檢驗(yàn)中，《獸藥典》也明確推薦了豬血清作為支原體檢驗(yàn)用液體培養(yǎng)基的組成成分。

并且，《獸藥典》指出在【豬支原體肺炎微量間接血凝試驗(yàn)】和【豬支氣管敗血波氏桿菌凝集試驗(yàn)】中需要陰性血清，即優(yōu)質(zhì)的豬血清，血源必然來(lái)自健康動(dòng)物。

1989年左右，也有國(guó)外學(xué)者建議用豬血清取代牛血清，用于培養(yǎng)制造非洲豬瘟病毒的細(xì)胞（見(jiàn)《動(dòng)物檢疫》 1991年01期《豬血清中的牛血清白蛋白抗體引起非洲豬瘟血清學(xué)診斷的假陽(yáng)性反應(yīng)》），原因是牛血清中的白蛋白會(huì)干擾非洲豬瘟抗體的檢測(cè)，造成假陽(yáng)性反應(yīng)。

04

其他動(dòng)物源血清

兔血清：

兔血清通常從六個(gè)月或更小的動(dòng)物身上收集，可用于與 BSA 結(jié)合用作免疫細(xì)胞化學(xué)[1]和免疫組織化學(xué)中的封閉血清[2]。

山羊血清：

多用做封閉液，也有一些研究人員發(fā)現(xiàn)，優(yōu)質(zhì)的山羊血清可用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)[3][4]。

雞血清：

從屠宰供人類食用的健康雞中收集的。有研究用于血清維生素 B12 的放射性同位素稀釋測(cè)定[5]。