在疫苗生產、生物制藥和細胞培養(yǎng)試驗中，支原體污染的預防和祛除，是保證生產質量和實驗順利的重要環(huán)節(jié)。

Minerva Biolabs

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德國MB

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眾多的大型生物藥廠以及數(shù)不過來的生物實驗室，預防、檢測，祛除支原體的產品，都更青睞MB公司的相關產品。

本期內容，我們將把MB品牌的『環(huán)境中支原體祛除、細胞中支原體檢測與祛除』產品，簡明扼要地介紹給大家，希望對疫苗生產、生物制藥、細胞治療、CAR-T等項目的質檢質控，以及更多實驗室的科研工作者，能有所幫助。

環(huán)境中

支原體祛除

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德國MB

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實驗環(huán)境中，支原體的祛除方法有很多。

但實際操作過程中，還是使用支原體專用清除噴霧或濕巾，更加高效、安全和便捷。

德國MB公司的Mycoplasma-off™可以算是“業(yè)界頂流”，有以下幾個特點：

（1）快速有效

噴霧劑中含有支原體專用殺除劑Mynox®，可在幾分鐘內迅速殺除支原體。

（2）廣譜抗菌

不僅能祛除支原體，而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、鼠諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

（3）無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑，無腐蝕性和致癌性成分

（4）操作簡便

即用型消毒液，可以快速簡單地保持工作區(qū)的清潔干凈。噴霧劑噴灑待消毒的表面，等待5-10min后，用干凈紙巾擦拭。無菌通風2-3分鐘。

對于水浴鍋、培養(yǎng)箱水槽等環(huán)境，可以選擇Water Shield™對其進行處理。與其他抑菌類產品相比，有以下幾個優(yōu)點：

• 長效：Water ShieldTM含表面活性劑、季銨鹽和絡合劑，不易揮發(fā)，可持續(xù)作用4周。

• 安全：不含醛類或疊氮化物，對細胞無毒害。

• 廣譜：預防支原體、細菌、真菌、霉菌、孢子污染。

• 方便：Water ShieldTM按1:200比例，直接加入水中，使用方便。

• 不產生水垢。

細胞中

支原體檢測

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德國MB

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要想準確判斷細胞是否被支原體污染，光靠觀察法是遠遠不夠的，靈敏度更高、特異性更強、耗時短、操作便捷的PCR法則是更好的選擇。其中，qPCR和常規(guī)PCR分別有其不同的適用場景及特點。

qPCR檢測

更適合疫苗等工業(yè)生產用戶使用，主要用到Venor®Gem qEP支原體檢測試劑盒。該檢測試劑盒有以下幾個特點：

1、遵循歐洲藥典和日本藥典操作流。

2、高特異性，一次檢測即可涵蓋所有常見易感染細胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細菌和真核DNA無交叉反應。

3、高靈敏度，zui低檢測限可達到≤10CFU/ml。

4、相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

5、有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。

常規(guī)PCR檢測

如果僅是實驗室日?？蒲羞^程中使用，無需對支原體進行定量檢測，則可以選擇Venor® Gem Classic支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒。

該試劑盒高特異性，僅一條陽性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。操作簡單，易于觀察。且覆蓋面廣，歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體，與細胞和真核DNA無交叉反應。

細胞中

支原體祛除

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德國MB

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一般情況下，細胞感染支原體，我們建議直接丟棄并對環(huán)境進行消毒處理，但總有一些特殊情況，導致我們愿意丟棄辛苦培養(yǎng)的細胞，這時就可以派細胞用支原體祛除試劑上場了。

Mynox®

對于無法長期培養(yǎng)的珍貴樣本或病毒收獲液，則推薦使用德國MB公司的Mynox® 。含有「治療液」和「鞏固防護液」。

「治療液」來自枯草桿菌提取物，可特異性地與支原體膜結合，改變支原體膜通透性，從而使支原體在2-3小時內破潰死亡。

「鞏固防護液」加入培養(yǎng)基，后續(xù)培養(yǎng)一個月，細胞將會清除支原體的污染，確切有效。

Mynox® Gold

若是可以培養(yǎng)超過一個月的細胞，則推薦使用德國MB公司的Mynox® Gold，直接殺除+鞏固防護兩步處理，祛除支原體的同時，可進一步在后續(xù)培養(yǎng)中鞏固清除效果，防止支原體“卷土重來”。

Zell Shield®

適合細胞已發(fā)生支原體污染，但又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)：如已轉染或大量擴增的細胞的情況。復合抗生素成分，抑制支原體蛋白和DNA合成，也抑制細菌和真菌。

先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細胞，能達到更好的祛除支原體的效果。