支原體是一種大小在細(xì)菌和病毒之間、可自我復(fù)制的原核細(xì)胞。它具有如下特點(diǎn)：

支原體無細(xì)胞壁，有簡(jiǎn)單的質(zhì)膜。具有高度多形性，多呈不規(guī)則球狀、長(zhǎng)絲狀，可分枝。可穿過0.45µm孔徑的濾膜。支原體寄生于人、動(dòng)物、植物、昆蟲細(xì)胞，為寄生生活。支原體容易附著于細(xì)胞表面，與宿主細(xì)胞胞膜融合并交換成分。

支原體無論是對(duì)于科研或臨床用的培養(yǎng)細(xì)胞，還是對(duì)于工業(yè)上的生產(chǎn)細(xì)胞，都會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的危害，例如導(dǎo)致細(xì)胞基因表達(dá)譜改變，但更多具體的改變并不清楚。

《Scientific Report》曾發(fā)表過一項(xiàng)研究，研究中報(bào)道了支原體感染乳腺上皮細(xì)胞，會(huì)引發(fā)炎性基因上調(diào)，導(dǎo)致細(xì)胞進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài)。

標(biāo)示著細(xì)胞進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài)的標(biāo)志是Lcn2基因表達(dá)升高。Lcn2基因常表達(dá)在參與先天免疫反應(yīng)的細(xì)胞中，這其中即包括上皮細(xì)胞。Lcn2基因的產(chǎn)物，在人即是NGAL蛋白，它是有名的腎損傷血清標(biāo)志物。NGAL可由各種組織的上皮細(xì)胞產(chǎn)生，這些組織包括腎、乳腺、子宮、肝臟、胃、小腸、結(jié)腸、肺臟等。以往在一些組織上觀察到，在病原菌入侵或出現(xiàn)應(yīng)激時(shí)，它的表達(dá)就會(huì)升高。

在《Scientific Report》上發(fā)表的這項(xiàng)研究中，作者采用了乳腺上皮細(xì)胞系HC11作為培養(yǎng)細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)不僅支原體污染能引發(fā)細(xì)胞內(nèi)的Lcn2基因表達(dá)升高，而且僅僅是向培養(yǎng)液中加入支原體膜上的一種成分——MALP-2脂肽，也能使細(xì)胞出現(xiàn)Lcn2的表達(dá)升高。

作者發(fā)現(xiàn)，在Lcn2升高之前，被支原體感染的細(xì)胞還出現(xiàn)了TNFα、IL-6和IκBζ表達(dá)增加。已知TNFα、IL-6是促炎性因子，而IκBζ是炎性信號(hào)通路上的關(guān)鍵分子。

作者還揭示了Lcn2基因活化的機(jī)制，是需要轉(zhuǎn)錄因子NFκB和C/EBP的參與。

該研究很好地詮釋了支原體污染細(xì)胞后，會(huì)使細(xì)胞進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài)，使炎性基因上調(diào)，從而影響整個(gè)細(xì)胞基因表達(dá)譜的改變。盡管是該研究是以乳腺上皮細(xì)胞為模型，但對(duì)其他上皮細(xì)胞乃至其他類型細(xì)胞，都具有借鑒意義。因此應(yīng)在平時(shí)的實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)中，注意支原體的預(yù)防和監(jiān)測(cè)，防止對(duì)實(shí)驗(yàn)和生產(chǎn)造成不良影響。

參考文獻(xiàn)：

Zhao, W., Bendickson, L. & Nilsen-Hamilton, M. The Lipocalin2 Gene is Regulated in Mammary Epithelial Cells by NFκB and C/EBP In Response to Mycoplasma. Sci Rep 10, 7641 (2020).

在支原體PCR檢測(cè)方面，推薦使用德國(guó)MB公司的支原體檢測(cè)試劑盒：Venor®Gem qEP

特點(diǎn)：

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求，通過藥典方法學(xué)驗(yàn)證。

②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無交叉反應(yīng)）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒經(jīng)典法檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。